Catalogue number: MG04（貨號(hào)：MG04）

1 ml MIDORIGreen Advance DNA/RNA stain for in gel or poststaining（1 ml MIDORIGreen Advance DNA / RNA染色劑，用于凝膠或后染色）

Benefits（優(yōu)點(diǎn)）:

• Perfect in-gel staining of DNA/RNA in agarose gels（瓊脂糖凝膠中DNA / RNA的完美凝膠內(nèi)染色）
• No toxicity, non-carcinogenic（無(wú)毒，無(wú)致癌性）
• Safe alternative to ethidium bromide（溴化乙錠的安全替代品）
• High fluorescence（高熒光）

• Optimal for UV-light（優(yōu)化適合紫外線(xiàn)）

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下一代凝膠內(nèi)染色

MIDORIGreen Advance是第二代非致癌染料。 經(jīng)過(guò)紫外線(xiàn)或藍(lán)/綠光激發(fā)后，信號(hào)更優(yōu)化。 它保持了諸如非致癌性和優(yōu)異的信噪比等優(yōu)勢(shì)。 如圖所示。 1當(dāng)使用Blue / Green LED技術(shù)時(shí)，MIDORIGreen Advance比溴乙錠更好。

圖1：使用藍(lán)/綠LED透射照明器比較MIDORIGreen Advance（左綠色）和溴化乙錠（右紅色）的靈敏度。

MIDORIGreen Advance即使對(duì)于較小的DNA片段也顯示出很高的靈敏度。 MIDORIGreen Advance的稀釋倍數(shù)可高達(dá)1：25000。 因此，對(duì)于100 ml瓊脂糖凝膠染色，4-6μl足夠，導(dǎo)致?17至25升染色的瓊脂糖凝膠。

經(jīng)驗(yàn)證的安全性

良好地替代誘變的DNA染色劑溴化乙錠以傳遞強(qiáng)信號(hào)是*的。 MIDORIGreen Advance發(fā)出的信號(hào)強(qiáng)度相當(dāng)。 但是，不得危及用戶(hù)的安全。 因此，使用MIDORIGreen Advance進(jìn)行了幾次測(cè)試，根據(jù)這些測(cè)試，MIDORIGreen Advance是安全的。

染色Protocol：

凝膠內(nèi)染色
準(zhǔn)備100毫升的瓊脂糖凝膠溶液（濃度為0.8-3.0％）并加熱，直到溶液*澄清，看不到小的漂浮顆粒。
在凝膠溶液中加入4-6 µl MIDORIGreen Advance DNA Stain，輕輕混合。將凝膠冷卻至50-60ºC，然后將凝膠澆鑄到凝膠托盤(pán)中。當(dāng)凝膠為固體時(shí)，加載樣品并進(jìn)行電泳。
使用UV或LED照明器檢測(cè)波段。黃色或綠色的明膠或玻璃紙濾鏡應(yīng)用于攝影。

后染
MIDORIGreen Advance DNA Stain后染液可以使用2-3次。
將要重復(fù)使用的染色溶液應(yīng)優(yōu)選在黑暗中于室溫下保存。
對(duì)于<0.5 cm厚的瓊脂糖凝膠，每100 ml緩沖液應(yīng)使用10-25 µl的污漬。
合適的染色時(shí)間（5 – 60分鐘）和污漬的數(shù)量可能取決于凝膠的厚度。

注意：不建議將SDS包含在加載緩沖液中使用，因?yàn)橛晌埸c(diǎn)和SDS相互作用引起的條帶外觀！

客戶(hù)常見(jiàn)問(wèn)題解答（FAQ）

問(wèn)：我可以將Midori Green Advance與脈沖場(chǎng)凝膠電泳（PFGE）一起使用嗎？通常，我使用EtBr進(jìn)行后期處理。

答：您可以在“Protocol”部分中找到進(jìn)行后染色的方案。

問(wèn)：您是否有處置Midori Green Advance的詳細(xì)信息？我了解該分子對(duì)光敏感，我想知道MGA凝膠在使用后是否可以在處置前暴露于光下？

答：MGA無(wú)毒，足以將其作為化學(xué)實(shí)驗(yàn)室廢物處理。 MGA的發(fā)射率會(huì)被光破壞，但這并不意味著化學(xué)結(jié)構(gòu)會(huì)發(fā)生變化。但是沒(méi)有必要破壞分子，因?yàn)樗匀粺o(wú)害。與溴化乙錠相比，這是*的優(yōu)勢(shì)–無(wú)需特殊處理。

問(wèn)：為什么不能以相同方式使用MGA和MGD？

答：化學(xué)結(jié)構(gòu)*不同。我們測(cè)試過(guò)將MGD用作MGA，反之亦然。我們不能同時(shí)推薦這兩種應(yīng)用。當(dāng)您嘗試將MGD用作MGA時(shí)，您需要大量MGD和階梯才能獲得可觀察的波段。通過(guò)這種方式可以檢測(cè)不到低濃度的樣品。 MGD設(shè)計(jì)用于添加樣品，并且濃縮程度遠(yuǎn)低于MGA。以MGA之類(lèi)的方式使用MGD是非常不經(jīng)濟(jì)的–您需要在凝膠中添加10倍以上的量才能觀察條帶。當(dāng)您嘗試將MGA用作MGD時(shí)，也會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題，因?yàn)镸GA的濃度過(guò)高，并且運(yùn)行方向相反。我試圖降低MGA濃度，在這種情況下，您會(huì)看到一些條帶，但它們與所使用的稀釋液無(wú)關(guān)，非常弱?？偨Y(jié)一下，您可以說(shuō)兩種染料都是針對(duì)不同的應(yīng)用（在凝膠中和添加到樣品中）設(shè)計(jì)的（具有不同的結(jié)構(gòu)式）和優(yōu)化的，因此不建議嘗試以其他方式使用它們。

問(wèn)：MGA和MGD有什么區(qū)別？這些污漬的穩(wěn)定性如何？

答：主要區(qū)別在于Midori Green Advance（MGA）用于凝膠和后染色（意味著它像溴化乙錠一樣使用），而Midori Green Direct（MGD）直接添加到樣品中。根據(jù)凝膠文檔系統(tǒng)的不同，我們建議您使用一種或另一種，但您可以在每種照明器（UV 302、365 nm，藍(lán)色照明器和藍(lán)色/綠色透射照明器）中同時(shí)使用這兩種照明器–只有性能可以提高到合適水平。例如，如果用戶(hù)使用UV透照器，我們建議使用MGA，因?yàn)槭褂迷撋叩男Ч浅：谩Ｎ覀兊乃{(lán)/綠色LED儀器和MGD可帶來(lái)非常出色的性能-*沒(méi)有背景，而且信號(hào)強(qiáng)度很高。兩種污漬在室溫下均穩(wěn)定，因此在室溫下運(yùn)輸沒(méi)有問(wèn)題，但我們建議將污漬保存在4°C下。

問(wèn)：MGA和MGD是否可以與瓊脂糖和丙烯酰胺凝膠一起使用？

答：我們的客戶(hù)給我們反饋說(shuō)MDG和MGA（染色后）可用于丙烯酰胺凝膠，但主要是為瓊脂糖凝膠設(shè)計(jì)的。

問(wèn)：如果我將MGA在-20°C下保存6天會(huì)怎樣？可以使用嗎？

答：凍結(jié)會(huì)破壞MGA的功能。您仍然可以嘗試，但我們的經(jīng)驗(yàn)使冷凍后的照明失效。

問(wèn)：我在瓊脂糖凝膠中使用Midori Green Advance，為什么在凝膠電泳35分鐘后看不見(jiàn)小條帶，您有什么建議？

答：Midori Green Advance可能帶有電荷，并且與DNA的方向不同，因此凝膠從底部脫色。要查看小樂(lè)隊(duì)，您可以將運(yùn)行時(shí)間減少到25分鐘。如果您想讓凝膠運(yùn)行更長(zhǎng)的時(shí)間，那么您可以*跡?？梢允褂胕n凝膠染色，然后縮短后染色時(shí)間，或者只對(duì)凝膠進(jìn)行后染色，而無(wú)需先進(jìn)行in凝膠染色。在這兩種情況下，整個(gè)凝膠都會(huì)被染色，并且觀察到非常低的分子量帶。您也可以使用Midori Green Direct代替Midori Green Advance。該染料會(huì)添加到DNA中，因此無(wú)論電泳多長(zhǎng)時(shí)間，每個(gè)條帶都會(huì)被染色。另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是不存在背景。特別是如果您使用藍(lán)色或藍(lán)色/綠色LED燈代替紫外線(xiàn)，則會(huì)收到令人驚奇的信號(hào)。

問(wèn)：在Midori Green Advance數(shù)據(jù)表上，描述了后期處理多可以使用2-3次。您可以在不損失太多敏感性的情況下使用發(fā)布后解決方案多長(zhǎng)時(shí)間？

答：實(shí)際上，我們的客戶(hù)使用頻率超過(guò)2-3次。如果染色浴始終變暗，您可以在任何情況下使用2-3次而不會(huì)降低信號(hào)強(qiáng)度。但也可以使用5 – 8次而不會(huì)降低信號(hào)，具體取決于凝膠的大小和樣品量。如果您檢測(cè)到強(qiáng)度降低，則可以增加一點(diǎn)MGA，從而獲得與以前相同的信號(hào)強(qiáng)度。

問(wèn)：到期后可以使用MGA嗎？

答：是的，您可以使用它。到期日期只是我們保證的短時(shí)間，但通常會(huì)持續(xù)更長(zhǎng)的時(shí)間。